本發明屬于生物醫藥技術領域,尤其涉及一種重組EBV gHgL免疫原的制備方法及其應用。本發明利用聚合酶鏈式反應PCR技術,獲得gH和gL的基因片段,將這兩個目的片段分別克隆入昆蟲表達載體pMT,經質粒大提去除內毒素后,與抗性篩選質粒pCoBlast一起共轉染黑腹果蠅Schneider2細胞,用殺稻瘟菌素進行陽性克隆篩選,篩選出高效分泌表達gHgL的S2穩定細胞系。擴大培養后,經鎳柱親和層析和凝膠過濾層析兩步純化,即可獲得高均一、高產量、高天然保真性的gHgL。通過微量熱涌動技術驗證了gHgL與受體EphA2的相互作用,適合作為免疫原用于EBV亞單位疫苗以及與gB和gp350聯合疫苗的研發。
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